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樣品準備 pH值：對于生化氧化，合適的pH值是6.5 - 7.5。超出此范圍的樣品pH值可能會導致 BOD測試值偏低。太高的話，用1M硫酸降低pH值；太低，用1M氫氧化鈉溶液提高pH值。 均質化：為獲得樣品的總BOD（包括所含顆粒），應將樣品均質化或進行其他特殊預處理步驟。當測試多個樣品時，每個樣品都應進行類似的預處理。 樣品體積：估算測試范圍確定樣品量，用相應的溢流瓶準確計量后倒入樣品瓶中。建議每個樣品重復2 - 3次。 預熱樣品：溫度變化會帶來氣體壓力的變化而導致誤差。在開始測量之前，需要將樣品預熱至20℃。將磁力攪拌棒放入樣品瓶中，打開攪拌系統(tǒng)，然后放入培養(yǎng)箱中，直至樣品溫度為20±1℃。 抑制硝化作用：硝化作用每mg NH4+會消耗4.57 mg/l O2，對BOD有顯著影響。為抑制硝化細菌的影響，向樣品中滴加硝化抑制劑（ATH）。硝化分為兩步：首先氨（NH4+）被氧化為亞硝酸鹽（NO2-），然后被氧化生成硝酸鹽 (NO3-)：NH4+ + 3/2 O2 ——> NO2– + 1/2 O2 ——> NO3– 密封樣品瓶：在干燥、無油脂的橡膠套中將3-4滴氫氧化鉀吸收劑放入樣品瓶頸部。然后將傳感器擰到BOD樣品瓶上以密封。
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